草酸銨結晶紫染色液是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。結晶紫是一種堿性染料，可以和細胞核中的DNA結合，從而產生細胞核染色。

　　

　　染色液主要由草酸銨、結晶紫、乙醇等組成。革蘭陽性菌染色中，細胞經草酸銨結晶紫染色后再經Gram碘液處理，形成不溶性復合物，該復合物不能通過細胞壁，不易被脫色，所以保持紫色。

　　

　　草酸銨結晶紫染色液操作步驟(僅供參考)：

　　

　　1、涂片：取待檢細菌，于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無菌水，取菌與水混合均勻，涂成薄層。

　　

　　2、干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥。

　　

　　3、固定：手持載玻片一端，標本面朝上，在酒精燈的火焰外側快速來回移動3~5次，每次1s，溫度不宜過高，防止菌體蛋白變性，放置待涼后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。

　　

　　4、初染：滴加結晶紫染色液染色1-2min，清水沖洗去染色液。

　　

　　5、媒染：滴加Gram碘液，并覆蓋載玻片室溫放置1-2min，水洗。

　　

　　6、脫色：滴加脫色液搖動，搖動10～30s，直至流下的脫色液不出現紫色為止，立即用水沖去脫色液，終止反應。

　　

　　7、復染：滴加沙黃染色液染色，30~60s，水洗。

　　

　　8、干燥。鏡檢：置油鏡觀察。

　　

　　染色結果：革蘭氏陽性菌：藍色至紫色；革蘭氏陰性菌：紅色。

　　

　　草酸銨結晶紫染色液的關鍵在于嚴格掌握脫色程度，脫色時間應根據經驗判斷。脫色過度，陽性菌可被誤染為陰性菌；脫色不夠，陰性菌可被誤染為陽性菌。