蛋白Marker(若為熒光蛋白上樣緩沖液配套的預(yù)染蛋白Marker)的作用如下:
1.分子量參照標(biāo)準(zhǔn)
在聚丙烯酰胺凝膠電泳中,
蛋白Marker作為已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)“尺子”,通過條帶位置對比,可精確推算目標(biāo)蛋白的分子量。這對于鑒定新蛋白或確認(rèn)蛋白完整性至關(guān)重要,例如研究抗癌藥物靶點蛋白時,分子量測定是初步特征描述的關(guān)鍵步驟。
2.實驗過程可視化監(jiān)控
若P1050為預(yù)染型蛋白Marker,其條帶在電泳過程中可直接觀察,幫助實時判斷電泳狀態(tài):
電泳進(jìn)度控制:通過預(yù)染條帶位置,預(yù)測目標(biāo)蛋白進(jìn)入凝膠最佳分辨區(qū)(如膠的2/3處)時停止電泳,優(yōu)化分辨率。
異常情況預(yù)警:若Marker條帶出現(xiàn)模糊、缺失或遷移異常,可及時終止實驗并排查問題(如凝膠濃度、電壓設(shè)置等)。
3.轉(zhuǎn)膜效率驗證
在WesternBlot實驗中,預(yù)染蛋白Marker可隨轉(zhuǎn)膜過程遷移至膜上,直觀顯示轉(zhuǎn)膜是否成功:
轉(zhuǎn)膜完整性評估:通過膜上Marker條帶的清晰度,確認(rèn)蛋白是否全轉(zhuǎn)移。
分子量標(biāo)記功能:在膜上直接標(biāo)注蛋白分子量,無需額外操作,簡化實驗流程。
4.實驗結(jié)果可靠性保障
條帶清晰銳利:預(yù)染Marker的條帶設(shè)計(如單色加深某些條帶、多色區(qū)分)便于快速識別分子量范圍,減少人為誤差。
穩(wěn)定性與重復(fù)性:高質(zhì)量預(yù)染Marker在不同緩沖體系和凝膠系統(tǒng)中表現(xiàn)穩(wěn)定,確保實驗結(jié)果可重復(fù),適合多批次或跨實驗室對比研究。
5.特殊實驗需求適配
熒光成像兼容性:若P1050為熒光蛋白上樣緩沖液配套的預(yù)染Marker,其熒光特性可與紫外燈、LED燈等成像系統(tǒng)兼容,無需染色脫色步驟,直接觀察凝膠或膜上的蛋白條帶,提高實驗效率。
極*條件耐受性:部分預(yù)染Marker支持80℃高溫處理或-20℃長期保存,適應(yīng)復(fù)雜實驗環(huán)境。