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簡述瑞士-姬姆薩染色液的步驟

更新時間:2016-04-21點擊次數(shù):6343

瑞氏-姬姆薩染色液是利用Romanowsky??Stain?技術原理改良而成的。主要應用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,著色清晰,色澤純正,但是對胞核著色偏深,核結構顯示較差。
瑞氏-姬姆薩染色液原理
瑞氏-姬姆薩染色液主要應用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技術原理改良而成的。細胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學親和作用。各種細胞及細胞的各種成分由于其化學性質不同,對瑞氏-姬姆薩染色液中的酸性染料(曙紅)和堿性染料(亞甲藍)的親和力也不一樣。因此,標本涂片經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色液染色后,相應各類細胞呈現(xiàn)不同的著色,從而達到辨別其形態(tài)特征的目的。
使用方法:
本產品可作為多種組織或細胞的染色使用,不同組織、細胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具體方法請根據(jù)自己需求參考既有文獻,本產品以涂片為例,舉例說明,僅供參考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆薩染液2-3滴覆蓋整個標本涂片,染1-2分鐘。
3、滴加等量的0.01M磷酸氫二鈉溶液,輕輕晃動玻片, 與瑞氏-姬姆薩染色液充分混勻,染色3-5分鐘。
4、水洗、吸干、鏡檢。
5、染色后胞漿和胞核的染色清晰分明,細胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿呈淺紅色,胞漿中顆粒區(qū)分明顯。
注意事項:
1、涂片厚薄適宜,涂片干透后固定,否則細胞在染色過程中容易脫落。
2、所加染液不能過少,以免蒸發(fā)而使染料沉淀。沖洗時間不能過久,以防脫色。
3、染色對pH十分敏感,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應接近中性,否則可能會導致細胞染色異常,形態(tài)難以識別,甚錯誤。
4、 染色過淡可以復染,復染時應先加緩沖液,然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。

瑞氏-姬姆薩染色液是由堿性染料美藍( Methvlem blue )和酸性染料黃色伊紅( Eostm Y )合稱伊紅美藍 染料即瑞氏(美藍-伊紅Y)染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子,無色部分為陽離子,其有色部分為酸性,故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是堿性的,美藍的中間產物結晶為三氯化鎂復鹽,其有色部分為陽離子,無色部分為陰離子,恰與伊紅鈉鹽相反。

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