組織無機(jī)磷含量檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC2845
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三A：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

2. 試劑三B：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

3. 試劑三：臨用前按試劑三A：試劑三B：試劑二=1:1:1的體積比例配制，配好的試劑三應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染，試劑三根據(jù)樣本量現(xiàn)用現(xiàn)配，限當(dāng)天使用。

4. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mmol/L磷標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：
無機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進(jìn)碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運(yùn)。
鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測(cè)定660nm光吸收，即可計(jì)算無機(jī)磷含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0302 mmol/L
線性范圍：0.0625-8 mmol/L
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
1、如果樣本測(cè)定吸光值大于1.5，需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋。如果樣本測(cè)定吸光值較低或接近空白值，建議增大樣本量后重新進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g腎臟加入1mL試劑一，離心取上清之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得A測(cè)定=0.696，A空白=0.051，A標(biāo)準(zhǔn)=0.282，按樣本質(zhì)量計(jì)算無機(jī)磷含量得：

無機(jī)磷含量(mmol/g質(zhì)量)= 0.001×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
= 0.001×(0.696-0.051)÷(0.282-0.051)÷0.1= 0.028 mmol/g質(zhì)量。

1. 取0.1g肝臟加入1mL試劑一，離心取上清之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得A測(cè)定=0.578，A空白=0.051，A標(biāo)準(zhǔn)=0.282，按樣本質(zhì)量計(jì)算無機(jī)磷含量得：

無機(jī)磷含量(mmol/g質(zhì)量)= 0.001×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
= 0.001×(0.578-0.051)÷(0.282-0.051)÷0.1= 0.023 mmol/g質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
Bu J, Yu J, Wu Y, et al. Hyperlipidemia affects tight junctions and pump function in the corneal endothelium[J]. The American Journal of Pathology, 2020.
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