北京索萊寶科技有限公司
專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC4020-50T/24S
更新時間：2024-04-12
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：827
010-50973130
產(chǎn)品分類
土壤亮*酸氨基肽酶（S-LAP）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC4020
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前取1瓶加入3 mL丙 酮溶解，用不完的試劑2-8℃保存一周。
產(chǎn)品說明：
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮*酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、離心機、水浴鍋、研缽、甲苯（不允許快遞）、丙 酮（不允許快遞）、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
取新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘干，過30-50目篩。
二、測定步驟
分光光度計預(yù)熱30min以上，波長調(diào)至405nm，蒸餾水調(diào)零。
加樣表：
| 測定管 | 對照管 | |
| 風(fēng)干土樣（g） | 0.1 | 0.1 |
| 甲苯（μL） | 50 | 50 |
| 震蕩混勻，室溫靜置15min。 | ||
| 試劑一（μL） | 850 | 850 |
| 試劑二（μL） | 100 | - |
| 置于30℃水浴鍋準(zhǔn)確反應(yīng)1h后，立刻煮沸5min（蓋緊，纏封口膜，防止崩開水分散失）。流水冷卻至室溫。 | ||
| 試劑二（μL） | - | 100 |
| 14000g，常溫離心10min，取上清于405nm處測定吸光值，分別記為A測定管、A對照管，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。 | ||
實驗實例：
稱取兩管0.1g三葉草土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.982-0.223=0.759，計算酶活得：S-LAP活性（U/g土樣）=1.689×ΔA÷W=1.689×0.759÷0.1=12.8195 U/g土樣。
稱取兩管0.1g土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.812-0.141=0.671，計算酶活得：S-LAP活性（U/g土樣）=1.689×ΔA÷W=1.689×0.671÷0.1=11.3332 U/g土樣。
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