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北京索萊寶科技有限公司

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直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱(chēng)
直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱(chēng)
Amylose Content Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào):BC4265-100T/96S

更新時(shí)間:2024-04-15

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1249

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直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào):BC4265
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱(chēng)規(guī)格保存條件
試劑一液體110 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體100 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑三液體55 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四-2-8℃保存
試劑五液體0.5 mL×1支2-8℃保存
試劑六液體10mL×1支2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:*100 mL自備;

  2. 試劑四:提供125 mL空瓶一個(gè);將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配,2-8保存半年;

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無(wú)水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直鏈淀粉,2-8℃保存半年。

產(chǎn)品說(shuō)明:
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷鍵鏈接的多糖鏈,直鏈淀粉含量影響著食品的食用品質(zhì)和外觀品質(zhì),與食品安全息息相關(guān)。
直鏈淀粉和碘形成藍(lán)色絡(luò)合物,利用乙醇分開(kāi)樣本中的可溶性糖和淀粉,再用碘與其反應(yīng)得到直鏈淀粉含量。

技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.0019 mg/mL
線性范圍:0.025-0.8 mg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、天平、臺(tái)式離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無(wú)水乙醇、EP管、蒸餾水。
操作步驟:
  • 樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

  1. 稱(chēng)取0.01g烘干樣本加入1mL試劑一,充分勻漿

  2. 80℃水浴提取30min,3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀;

  3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀;

  4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清待測(cè)。

二、測(cè)定步驟
  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)雙波長(zhǎng)至550nm485nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋?zhuān)?/span>取40μL 10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入960μL試劑四,充分混勻,配制成0.4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實(shí)驗(yàn)中每管需要20μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。)

  3. 操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑)

試劑名稱(chēng)測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
樣本(µL)20--
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL-20-
蒸餾水(µL)--20
試劑五(µL)444
試劑六(µL)444
蒸餾水(µL)172172172
充分混勻,測(cè)定550nm和485nm處的吸光值,550nm下的測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,485nm下的分別記為A’測(cè)定、A’標(biāo)準(zhǔn)和A’空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白)-A’測(cè)定-A’空白),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)1-2次。
三、直鏈淀粉含量計(jì)算
直鏈淀粉含量(mg/g質(zhì)量)=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V樣總÷W=2×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,0.4mg/mL;V樣總:加入試劑四體積,5mL;W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
  1. 反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測(cè)完成防止褪色。

  2. 若A測(cè)定大于0.95,建議樣本上清用試劑四稀釋后再進(jìn)行測(cè)定;若A測(cè)定低于0.07時(shí),可以提取時(shí)減少試劑四體積進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
  1. 取0.01g烘干玉米于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中,80℃水浴提取30min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(*)振蕩5min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清,之后按照測(cè)定步驟操作,使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白)-A’測(cè)定-A’空白)=0.395-0.047-0.283-0.058=0.123,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)=0.517-0.047-0.317-0.058=0.211,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:直鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=2×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=116.59 mg/g 質(zhì)量。

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0700/BC0705  淀粉含量檢測(cè)試劑盒
BC0610/BC0615  α-淀*酶(α-AL)活性檢測(cè)試劑盒
BC4270/BC4275  支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒
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直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法 直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法


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