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北京索萊寶科技有限公司

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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法糖代謝系列BC4440-50T/48S半纖維素含量檢測試劑盒 糖代謝

半纖維素含量檢測試劑盒 糖代謝
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
半纖維素含量檢測試劑盒 糖代謝
有效期
6個月
單位

英文名稱
Hemicellulose Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號:BC4440-50T/48S

更新時間:2024-04-16

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1609

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

半纖維素含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號: BC4440

規(guī)格: 50T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

提取液一

液體30 mL×1

常溫保存

提取液二

液體30 mL×1

常溫保存

試劑一

液體60 mL×1瓶(自備)

2-8℃保存

試劑二

液體10 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:80%乙醇自備;

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg D-木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解配制成10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。2-8℃保存4周。

產(chǎn)品說明:

半纖維素是指在植物細(xì)胞壁中與纖維素共生、可溶于溶液,遇酸后遠(yuǎn)較纖維素易于水解的那部分植物多糖,廣泛存在于植物中,其分布因植物種屬、成熟程度、早晚材、細(xì)胞類型及其形態(tài)學(xué)部位的不同而有很大差異。一種植物往往含有幾種由兩或三種糖基構(gòu)成的半纖維素,其化學(xué)結(jié)構(gòu)各不相同。半纖維素是一種新型的可利用能源。

半纖維素在一定條件下水解為還原性糖類,還原糖在堿性條件下與3,5-二硝基水楊酸(DNS)加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物,DNS則被還原為棕紅色3-氨基-5-硝基水楊酸,在540nm處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測半纖維素的含量

技術(shù)指標(biāo):

低檢出限:0.2311 mg/mL

線性范圍:0.4-2.5 mg/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:

天平、可見分光光度計、臺式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽、30~50目篩、蒸餾水、EP管。

操作步驟:

一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

樣本自然風(fēng)干或用烘箱烘干至恒重,研缽充分研磨后,過30~50目篩。

 

二、測定步驟

1、 分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長至540 nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用蒸餾水稀釋至2.5、2、1、0.8、0.60.4 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。

3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

序號

稀釋前濃度(mg/mL

標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL

蒸餾水體積(µL

稀釋后濃度(mg/mL

1

10

50

150

2.5

2

10

40

160

2

3

10

50

450

1

4

1

160

40

0.8

5

1

120

80

0.6

6

1

80

120

0.4

備注:實(shí)驗(yàn)中每個標(biāo)準(zhǔn)管需125µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4、 操作表(在1.5 mL EP管中操作):

試劑名稱

空白管

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

樣本(g


0.05


試劑一(μL


1000


漩渦混勻,90℃水浴10 min,25℃,8000 g離心10 min,棄上清留沉淀

蒸餾水(μL


1000


漩渦混勻,25℃,8000 g離心10 min,棄上清,此步驟重復(fù)三次,取沉淀,烘干至恒重

提取液一(μL

500

500


90℃水浴1 h,自然冷卻至室溫

提取液二(μL

500

500


漩渦混勻,25℃8000 g離心10 min,取上清待測

上清液(μL

125

125


標(biāo)準(zhǔn)液(μL



125

試劑二(μL

125

125

125

蒸餾水(μL

750

750

750

漩渦混勻,90℃水浴5 min,自然冷卻至室溫

1 mL反應(yīng)液于1 mL玻璃比色皿中,在540 nm下測定吸光值A,分別記為A空白、A測定、A標(biāo)準(zhǔn),計算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白,ΔA測定=A測定-A空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測定1-2次。

三、半纖維素含量計算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(xΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(xΔA測定)帶入公式計算樣本濃度(y,mg/mL)。

2、半纖維素含量的計算:

半纖維素含量(mg/g 干重)= y×V樣總÷W×F= y÷W×F

V樣總:加入提取液體積,1 mL;W:樣本質(zhì)量,g;F:稀釋倍數(shù)。

 

注意事項(xiàng):

1、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。

2、建議將加入提取液二離心后的上清液稀釋10~20倍后檢測。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)

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