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當前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法脂肪酸代謝系列BC1890-50T/48S游離*固醇(FC)含量測試盒 脂肪酸代謝

游離*固醇(FC)含量測試盒 脂肪酸代謝
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
游離*固醇(FC)含量測試盒 脂肪酸代謝
有效期
6個月
單位

英文名稱
Free Cholestenone(FC) Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC1890-50T/48S

更新時間:2024-07-09

廠商性質:生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1555

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產(chǎn)品介紹


游離*固醇(FC)含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC1890
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制:

  1. 提取液:自備異丙醇,大約需要60mL,常溫保存;試劑盒內提供一個30mL棕色空瓶,僅做分裝使用,請自行標注試劑名稱。

  2. 標準品:10 mg*固醇,臨用前加入517 μL提取液,振蕩溶解,即為50 μmol/mL的*固醇標準品,2-8℃可保存4周。

  3. 工作液的配制:根據(jù)樣本量將試劑一:試劑二按9mL:60μL(約10T)的比例配制工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:
FC是構成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。測定原理:FC氧化酶催化FC生成4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安*比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、天平、低溫臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、可調式移液槍、EP管、冰、蒸餾水、異丙醇(AR,98%。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:

  1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者用提取液稀釋樣本(血清(漿)用蒸餾水稀釋)后再進行測定。注意同步修改計算公式。

  2. 提取液中含有使蛋白變的成分,故按蛋白濃度計算時需要重新提取蛋白進行測定。

實驗實例:

  1. 0.1054g大鼠腎臟加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.592-0.053=0.539,根據(jù)標準曲線y=0.7703x-0.0021R2=0.9989,計算x=0.702,按樣本質量計算含量得:

FC含量(μmol/g 質量)=x÷W ×F =6.66 μmol/g 質量。

  1. 5×106BNL細胞加入1mL提取液進行超聲破碎,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.138-0.053=0.085,根據(jù)標準曲線y=0.7703x-0.0021,R2=0.9989,計算x=0.113,按細胞數(shù)量計算含量得:

FC含量(μmol/106 cell= x÷N×F =0.0226 μmol/106 cell。

  1. 取人血清樣本,直接按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A空白=0.337-0.041=0.296,根據(jù)標準曲線y=0.7703x-0.0021,計算x=0.387,R2=0.9989,按血清(漿)等液體體積計算含量得:

FC含量(μmol/dL=x×100×F =38.7 μmol/dL
相關發(fā)表文獻:

  1. Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. April 2019;127:178-186.

  2. Huan Guo,Shang Lin,MinLua Jia,et al. Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) cul tivars. International Journal of Biological Macromolecules. December 2018;

  3. Yao L, Chen S, Li W. Fatostatin inhibits the development of endometrial carcinoma in endometrial carcinoma cells and a xenograft model by targeting lipid metabolism[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2020: 108327.

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